苗木基地
白蠟植物組織培養的技術操作
白蠟培養基的成分及配制
白蠟培養基是白蠟植物組織白蠟培養的重要基質。在離體白蠟培養條件下,不同種白蠟植物的組織對營養有不同的要求,甚至同一種白蠟植物不同部位的組織對營養的要求也不相同,只有滿足了它們各自的特殊要求,它們才能很好地生長。因此,沒有一種白蠟培養基能夠適合一切類型的白蠟植物組織或器官,在建立一項新的白蠟培養系統時,首先必須找到一種合適的白蠟培養基,白蠟培養才有可能成功。
在白蠟植物組織白蠟培養歷史進程中,事實上也緊密地伴隨著白蠟培養基的研制史。對白蠟植物的營養要求的不斷認識,對已有白蠟培養基的改進,或者將新發現的白蠟植物激素、新的有益成分應用于白蠟培養基之中,都大大促進了組織白蠟培養研究的迅速發展,取得越來越多的成功。
白蠟培養基的成分白蠟培養基的成分主要包括水、無機養分、有機養分、白蠟植物生長調節物質、介質或載體。
①水水是白蠟植物原生質體的組成成分,也是一切代謝過程的介質和溶劑。它是生命活動過程中不可缺少的物質。配制白蠟培養基母液時要用蒸餾水,以保持母液及白蠟培養基成分的精確性,防止貯藏過程發霉變質。大規模生產時可用自來水。但在少量研究上盡量用蒸餾水,以防成分的變化引起不良效果。
②無機養分無機養分是指白蠟植物在生長發育時所必需的各種化學元素。主要是各種礦物質、無機鹽等。根據白蠟植物對無機營養的吸收量,可以將它們分為大量元素和微量元素。
大量元素是指白蠟植物所需濃度大于0.5mol/L的元素,有氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫、碳及來源于水中的氫和氧。微量元素是指白蠟植物所需濃度小于0.5mol/L的元素,微量元素主要有鐵、錳、鋅、銅、硼、碘、鉬和鈷。
③有機養分白蠟培養基中若只含有大量元素與微量元素,常稱為基本白蠟培養基。為達到不同的白蠟培養目的往往要加入一些有機物以利于快速生長。常加入的有機成分主要有以下幾類。
碳水化合物糖作為碳源在白蠟植物組織白蠟培養中是必不可少的,它不僅能夠提供給白蠟植物材料能量,而且也能維持一定的滲透壓。常用的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨糖等,麥芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在組織白蠟培養中也有應用。最常用的是蔗糖,蔗糖使用濃度在2%~3%。
維生素這類化合物在白蠟植物細胞里主要是以各種輔酶的形式參與多種酶系的反應直接影響到蛋白質、糖、脂肪等物質的代謝活動,對生長、分化等有很好的促進作用。主要有鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、抗壞血酸、泛酸鈣、生物素、葉酸、鈷胺素(維生素、維生素B2等。一般用量為0.1~1.0mg/L,有時用量較高。維生素具有熱易變性易在高溫下降解,可進行過濾滅菌。
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